铁的测定

中微量铁

一、实验目的

•1．了解分光光度计的结构和正确的使用方法；•2．学习吸收曲线的制作方法，理解最大吸收波长

的意义；

•3．掌握朗伯比尔定律的应用。

二、实验原理

•

邻菲罗啉（又称邻二氮杂菲）是测定微量铁的一种较好试剂，其结构如下：

•

•在pH=3～9的条件下，Fe2+与邻菲罗啉生成很稳定的橙红色的络合物，反应式如下：•

•此络合物的logK稳=21.3，ε=11000。

3+2+•在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe还原为Fe

：

•4 Fe3++2NH2OH═4 Fe2++N2O+H2O+4H+•测定时，控制溶液酸度在pH=3～9较适宜，酸度过高，反应速度慢，酸度太低，则Fe2+水解，影响显色。•Bi3+、Ca2+、Hg2+、Ag+、Zn2+离子与显色剂生成沉淀，Cu2+、Co2+、Ni2+离子则形成有色络合物，因此当这些离子共存时应注意它们的干扰作用。

•在pH约为5的HAc-NaAc缓冲溶液中，Fe2+与邻

二氮菲(phen)生成稳定的橙红色络合物，λmax＝510nm, ε＝1.1×104L/(mol·cm)。在510nm处吸

光度与其浓度成正比，符合朗伯-比尔定律，用标准曲线法可求得试样中微量Fe2+的测定。

三、主要仪器与试剂•1．仪器

•722型分光光度计、10mL吸量管，50mL容量瓶。•2．试剂••••

(1) 铁标准溶液（含铁100μg/mL）；(2) 0.1%邻菲罗啉溶液；(3) 5%盐酸羟胺溶液；

(4) HAc-NaAc缓冲液（pH=4.6）。

四、实验步骤

•1．邻菲罗啉-亚铁吸收曲线的绘制•

准确吸取铁标准溶液（含铁10μg/mL，用含

铁100μg/mL 配制）4mL于50mL容量瓶中，依次加入5mL HAc-NaAc缓冲液、2mL盐酸羟胺溶液、

5mL邻菲罗啉溶液，用水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟。以水作参比溶液，用1cm比色皿和722型分光光度计在=440-600nm分别测定吸光度A。•

•

以所得吸光度A为纵坐标，相应波长λ为横坐标，在坐标纸上绘制A与λ的吸收曲线。从吸收曲

线上选择测定铁的适宜波长，一般选用最大吸收波长λmax为测定波长。

•2．标准曲线的绘制•

准确吸取铁标准溶液（含铁10μg/mL）0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL于六个50mL容量瓶

中，依次加入5mLHAc-NaAc缓冲液、2mL盐酸羟胺溶液、5mL邻菲罗啉溶液，用去离子水稀释至刻度

，摇匀，放置10分钟。以不加铁的试剂溶液作参比，用1cm比色皿，在λmax处分别测定吸光度A。

•。

以显色后的50mL溶液中的含铁量(µg)为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制测定铁的标准曲线

•3．试样中微量铁的测定•

准确吸取试样10mL于50mL容量瓶中，按照绘

制标准曲线的实验步骤，配制溶液并测定吸光度

Ax，从标准曲线上查出对应的铁的质量，并求原

试样中铁含量的浓度（µg/mL）。

五、数据记录及结果处理

1．吸收曲线绘制和测量波长选择

由吸收曲线可得，λmax=

nm。

2．标准曲线的绘制和铁含量的测定

若由标准曲线上查出对应的铁含量为cx，

则原试样中铁含量的浓度cFe计算：

cxcFe(g/mL)10.0mL七、注意事项

•1．为了防止光电管疲劳。不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使光

路切断，以延长光电管使用寿命。

•2．比色皿使用注意事项：

•1）每台仪器与比色皿配套，不能与其它仪器上的比色皿调换；•2）拿取比色皿时，手指不能接触其透光面；

•3）装溶液时，先用该溶液润洗比色皿内壁2～3次，被测溶液以装••

至比色皿的3/4高度为宜，并用滤纸轻轻吸去比色皿外部的液体，再用擦镜纸小心擦拭透光面，直到洁净透明；

•4）测定系列溶液时，通常按由稀到浓的顺序测定；•5）实验完毕，及时把比色皿洗净、晾干，放回比色皿盒中。

附722型分光光度计简要操作方法

：

•①预热仪器。为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热20min。预热仪器和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断，防止光电管疲劳；•②选定波长。转动波长调节器，使指针指示所需要的单色光波长。

•③调节“T＝0”点。打开吸收池暗室盖（光门自动关闭），使读数模式调至[T]上，在调节[0%T]旋钮，使数字显示为“00.0”；•④调节T=100％。轻轻盖上吸收池盖（将参比溶液置于光路）,调节透光率[100%T]旋钮，使数学显示为“100.0”；•⑤测定。使读数模式调至[A]，轻轻拉动比色皿座架拉杆，使被测溶液进入光路，此时显示屏所示数据为该溶液的吸光度A；•⑥测量完毕，取出比色皿洗净,晾干,存于专用盒内。关机,拔下电源插头，盖上防尘罩,填写使用记录；