一.实验目的
1. 学习家兔的基本手术操作 2. 观察血液凝固现象 3. 了解血液凝固的基本过程
4. 观察某些因素对血液凝固的影响 二.实验材料 1. 实验动物 家兔
2. 器材与药品 哺乳动物实验动物手术器械一套 ,清洁小试管 6 支 ,水 浴装置 1套,
冰块,棉花、液状石蜡,肝素,草酸钾,,肺组织悬液 ,生理盐水 等
三.实验方法与步骤
1. 动物手术
(1)将家兔称重后 ,按 5ml/kg 的剂量自耳缘静脉缓慢注射 20%乌拉坦
( 2)麻醉完成后将家兔以仰卧位固定于兔手术台上 ,将颈部被毛用 粗剪剪去 ( 3)在颈部腹面正中从甲状软骨水平至胸骨上缘 (约一指 )连线正中 做一长
5~7cm的纵形切口,依次钝性分离皮下组织、肌肉及气管表面 结缔组织直至暴
露气管。
(4)分离一侧的颈总动脉,将颈总动脉游离2~3cm,穿双线备用。用其 中一线结扎颈总动脉远心端 ,近心端用动脉夹夹闭。用眼科剪在颈总 动脉靠近远心端结扎线处剪一斜口 (约 45 度 )将动脉插管向心脏方向 插入动脉内约1cm,用另一线结扎,以备取血。 (5)分离气管,行气管插管术。
2. 实验准备 准备好6个试管,并对人员进行分工
编号 1 2 3 4 5 6 7 实验条件 凝血所需时间 分析讨论 加棉花少许 用液状石蜡润湿试管表面 置于37摄氏度水浴槽中保温 置于水浴槽中 加肝素8U 1~2滴(加血后摇匀) 加草酸钾1-2ml(加血后摇匀) 加肺组织悬液0、1ml 对照 不加 3. 取血打开动脉夹,经颈总动脉插管放血入各试管中,每支试管采血 约1ml。注
意及时记录采血完成时间并将各试管尽快置于其实验条件 下,5,6两支试管加入血液后要充分摇匀。
4. 理化因素对血液凝固的影响及其结果观察
接触面粗糙程度、温度以及试剂对血液凝固的影响 观察各试管内血
液凝固所需时间。在每支试管采血完成后开始计时,每隔15s将试管轻 轻倾斜1次,观察试管中的血液就是否凝固,发现血液呈凝胶状不再流 动时停止计时,以此得到各试管血液凝固所需时间。在本实验条件下 超过30min血液未凝可视为“不凝”。
四.实验结果
不同理化环境中血液凝固的时间
编号
1 2
实验条件 对照管 少许棉花
凝血时间
16mi n 15s 8min 45s
3 4 5 6
液体石蜡润滑试管内表面
37 r水槽中
23min 11s 9min 37s 55min 11s
肝素8U
2%草酸钾溶液1、5ml
不凝
6min 47s
7 肺组织液0、1ml
五.实验讨论 注意事项:
1、采血时要一次性将全部试管采血完毕,多次放血可能导致动脉 插管内血
液发生凝固,阻塞插管。
2、 各血管的采血量要大致相等。
3、 观察液体石蜡润滑过的试管内的血液就是否凝固时
,要在 倾
斜试管的同时,用手指轻弹试管底部,以排除表面张力等因素造成的 血液已凝固的假象。
4、 草酸钾为结晶固体,加入血液后要充分混匀 结果分析:
石蜡能使试管表面光滑从而延长凝固时间。
肝素主要就是主要就是通过与抗凝血酶皿结合引起抗凝血酶 皿构型发生
变化,加速凝血酶-凝血酶复合体形成而产生抗凝作用。
草酸钾作用原理就是溶解后解离的草酸根与血液中的
成草酸钙沉淀,使Ca2+失去凝血功能,凝血过程被阻断。
肺组织激活外源性凝血途径加速凝血
Ca2+形
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