４２ 北方药学２０１２年第９卷第５期 新型模式生物斑马鱼及其胚胎在人类疾病模型研究中的应用△ 王晓伟 张红翠 安晓晶 王振华 （，特种植物药资源教育部重点实验室，石河子大学药学院石河子８３２００￣ 摘要：斑马鱼作为一种理想的模式动物在遗传学，发育生物学的研究中应用越来越广泛。由于斑马鱼具有容易获得，易于饲养， 生殖周期短．繁殖能力强等特点，且其基因组测序的完成及与人类的高度保守性，使得斑马鱼及其胚胎在关于人类疾病的研究 中有着重要的应用和实际价值。本文就斑马鱼及其胚胎在人类疾病研究中的应用作一简要概述。 关键词：模式生物斑马鱼疾病模型 中图分类号：Ｑ７５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７２—８３５１（２０１２）０５—００４２—０２ 模式生物是生命科学研究的重要材料，斑马鱼（Ｄａｎｉｏ ｒｅ— 心肌病变，据此可建立斑马鱼心肌病变模型 ；人类Ｔｂｘ５基因 ｎｏ）及其胚胎因为具有众多的优点在生命科学研究中具有突 突变会造成心脏发育畸形，而斑马鱼的Ｔｂｘ５突变同样会造成 出的地位，在近几年的研究中受到越来越多的重视和利用。 胚胎发育过程中出心脏畸形，并且会使得胸鳍的发育受到影 １９８１年，美国Ｏｒｅｇｏｎ大学的著名遗传学家Ｓｔｒｅｉｓｉｎｇｅｒ等在 响，据此可建立斑马鱼心脏病模型ｌ１Ｏｌ。崇梅㈣等人通过显微注 Ｎａｔｕｒｅ上发表了第一篇有关斑马鱼的科研论文『】１，从而开启了 射发现，Ｔｂｘ２基因沉默的斑马鱼胚胎在发育过程中会出现不 斑马鱼作为模式生物运用于生命科学的先河。斑马鱼现已被 同损伤程度的心脏发育障碍，证明Ｔｂｘ２在心脏发育过程中起 广泛地应用于发育和遗传毒理学、医学、生物学、药物研发、环 着重要的作用。 境毒理学等研究领域脚。本文就斑马鱼及其胚胎应到人类相关 ３．３眼部疾病 疾病的研究作一简要概述。 斑马鱼发育早期，眼部占脑部的１／２，成鱼对光照敏感，且 １斑马鱼及其胚胎在人类疾病研究中所具有的优势 昼夜节律明显，因而斑马鱼对人类视觉疾病的相关研究具有 作为模式生物，斑马鱼及其胚胎具有以下优点：①斑马鱼 极大的帮助。通过眼睛过小或皮肤上的色素沉积这一特点，有 亲鱼体形小，易于管理，极大地减少了饲养空间和管理成本； 利于快速发现和筛选具有眼科疾病表形的斑马鱼突变体。色 ②斑马鱼雌鱼产卵量大，每次可产约３００枚，实验用样本基数 素性视网膜炎和年龄相关性黄斑变性（ＡＭＤ）疾病都可以引起 大，确保统计学意义；胚胎药物处理简单，需求量少；③胚胎体 眼部疾病，斑马鱼ｇｎｎ基因突变的胚胎眼睛圆锥状细胞发育 外发育，发育周期短，从受精卵到仔鱼在正常条件下只需７２ｈ， 早期与ＡＭＤ引起的眼部锥形细胞由于营养供给紊乱所造成 借助显微镜可清楚的观察整个发育过程；④发育初期透明，通 的眼部疾病相似，并且ｇｎｎ胚胎突变体眼部细胞在后续的发 过特定基因标记，可以直观的观察靶基因的表达；⑤应用到原 育与人色素性视网膜炎类似，因而斑马鱼的ｇｎｎ胚胎突变体 位杂交技术和免疫组化技术。 可以应用到这两种疾病的发生发展机理的研究中㈣。 ２斑马鱼及其胚胎用于人类相关疾病研究的技术及方法 ３．４神经系统疾病 斑马鱼及其胚胎应用到研究中的有关技术越来越成熟， 帕金森氏病（ＰＤ）是脑部的黑质一纹状体的多巴胺能通路 如胚胎靶细胞标记技术、组织器官移植、胚胎单倍体培育、靶 受到损伤所致。化学毒性物质ＭＰＴＰ（１一甲基一１—４－苯基一 基因诱变、转基因、基因过表达、敲除及沉默技术、细胞克隆 ｌ，２，３，６－四氢吡啶）可以造成与ＰＤ相似的现象。Ｍｃｋｉｎｌｅｙ等 等ｆ１Ｉ３一。 ㈣研究人员通过对斑马鱼幼鱼进行ＭＰＴＰ染毒造成其多巴胺 斑马鱼及其胚胎作为人类相关疾病模型研究的方法主要 能神经细胞损伤从而建立类似人类ＰＤ的斑马鱼模型。借此模 包括：①人类相关疾病模型的建立。常用的方法是正向和反向 型，研究者们发现Ｌ一塞利吉林（单氨氧化酶抑制物）及诺米芬 遗传法。②借助模型对化合物进行活性筛选。③相关作用机制 辛（多巴胺转运蛋白抑制物）具有保护多巴胺能神经细胞的作 研究。 用。此外，斑马鱼体内的Ｐｈｏｘ２ｂ（与神经脊疾病发生相关）和 ３斑马鱼及其胚胎作为人类相关疾病模型的研究应用 Ｕｃｈ—Ｌ１９（跟ＰＤ相关）基因与人类具有高度保守性，因而可以 斑马鱼及其胚胎的视觉及神经系统、组织器官等在基因 通过斑马鱼及相关模型的建立来研究与此基因相关的神经系 水平上与人类具有高度的保守性，并且斑马鱼胚胎早期发育 统疾病『】４１。 与人类极为相同，而其最大优势是繁殖迅速，快速繁殖有利于 阿尔茨海默病（ＡＤ）是大脑神经细胞大量死亡所导致。研 基因筛选嘲。 究发现，淀粉样蛋白尤其是Ｂ样淀粉蛋白的表达过量在ＡＤ ３．１造血系统疾病 病的发生发展中起着巨大的作用。ＡＢ（Ｂ样淀粉蛋白）由ＡＰＰ 斑马鱼发育早期透明，可直接观察血液系统的发生发展， （淀粉样前体蛋白）切割产生，其大小长度由 一分泌酶决定。科 如血液循环、心脏跳动。斑马鱼的造血系统包括红系、髓系、淋 研人员Ｃａｎｍｐｂｅｌ［￣等对ＡＢ产生有关的基因如Ｐｅｎ２、Ｐｓｅｎ１及 系及血小板等，其造血过程及造血区域与高等脊椎动物高度 Ｐｈｌ等进行敲除，发现Ｐｅｎ２对依赖于ｐ５３的神经细胞存活具 相似悯。鉴于这些优点，斑马鱼成为了研究造血系统疾病研究 有重要影响。 的最佳模式生物。目前对红系造血病尤其是贫血症的相关研 除此，斑马鱼的感觉器官如嗅觉、听觉等大多分布在体 究比较透彻，研究者们建立了相关疾病的斑马鱼模型，如可遗 表，利用行为学分析方法及手段可以很容易地对嗅觉及听觉 传的地中海贫血模型、斑马鱼Ｆｅ幼粒红细胞性贫血模型等 。 等神经功能进行相关测验 。 白血病是青少年最常见的一种恶性肿瘤。Ｌａｎｇｅｎａｕ等 嘬 ３．５血管生成 先建立了斑马鱼的白血病模型。研究者将来源于小鼠ｃ—ｍｙｅ 在肿瘤、糖尿病、心脏病等疾病的进程中都伴随有血管新 基因与斑马鱼胚胎的Ｒａｇ２基因融合，然后在此基因团的尾部 生，利用斑马鱼血管新生模型可以筛选出血管生成促进剂或 连接上发绿色荧光的ＧＦＰ基因，再将ｃ—ｍｙｅ—Ｒａｇ２一ＧＦＰ的融 抑制剂从而在这些疾病的治疗中发挥作用。在癌症治疗领域， 合体移人到斑体细胞中，使所有接受过基因移植的斑马鱼均 利用斑马鱼研究肿瘤的血管生成备受关注。已有研究表明，麦 表达此基因，就此建立了斑马鱼白血病模型。 考酚酸对进行血管标记绿色荧光蛋白的转基因斑马鱼血管生 ３．２心脏疾病 长具有抑制作用，且呈现出剂量依赖性；经血管内皮生长因子 斑马鱼ＴＮＮＴ２基因的功能与人类相似，其突变都可导致 ＶＥＧＦ注射的斑马鱼胚胎，检测到其体内有明显的新生血管生 北方药学２０１２年第９卷第５期 ４３ 成。肿瘤的发生发展与肿瘤内部的血管新生有密切联系，因而 Ｔ ｃｅｌｌ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｉｎ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９９（５６０８）： 在肿瘤治疗领域可采用阻抑ＶＥＧＦ抑制新生血管形成及原有 ８８７－８９０． 血管生长来达到治疗肿瘤作用旧。研究人员利用转基因斑马鱼 ［９］Ｓｅｈｎｅｔｒ Ｍ，Ｈｕｑ Ａ，Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ ＢＭ，ｅｔ ａ１．Ｃａｒｄｉａｃｔｏｐｏｎｉｎ Ｔ 对化合物进行斑马鱼胚胎血管生成实验，证明大黄素、芦荟大 ｉｓ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｉｎ ｓａｒｃｏｍｅｒｅ ａｓｓｅｍｂｌｙ ａｎｄ ｃａｒｄｉａｃ ｃｏｎｔｒａｃｔｉｌｉｔｙ．Ｎａｔ 黄素及大黄酸对血管生成具有抑制作用，提示大黄的抗炎作 Ｇｅｎｅｔ。２００２。３１（１）：１０６一ｌ１０． 用可能与其具有血管生长抑制作用有关【ｌ圈。 ｆ１０］Ｇａｒｒｉｔｙ ＤＭ，Ｃｈｉｌｄｓ Ｓ，Ｆｉｓｈｍａｎ ＭＣ．Ｔｈｅ ｈｅａｒｔｓｔｉｒｎｇｓ ｍｕｔａ— ３．６肿瘤 ｔｉｏｎ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｃａｕｓｅｓ ｈｅａｒｔ／ｉｆｔ Ｔｂｘ５ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ『Ｊ１． 斑马鱼可以自发的产生肿瘤，其发生发展过程与人类极 Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２００２，１２９（１９）：４６３５—４６４５． 为相似，具有稳定遗传性，遗传背景相对简单，斑马鱼体内与 【１１］崇梅，桂永浩，成璐，等．斑马鱼，ｒｂｘ２基因阻抑先天性心脏病 肿瘤相关的基因与人类具有高度的保守性［１９，２０１。 模型的建立与研究［Ｊ］．中华医学杂志，２００７，８７（１４）：９９１－９９４． 在肿瘤的发生及发展过程中，细胞周期受到阻滞，遗 ｆ１２］Ｂｉｅｈｌｍａｉｅｒ Ｏ，Ｎｅｕｈａｕｓｓ ＳＣ，Ｋｏｈｌｅｒ Ｋ．Ｄｏｕｂｌｅ ｃｏｎｅ ｄｙｓ￣ｏ— 传物质ＤＮＡ的损伤修复功能受阻，因此在实际的治疗过程中 ｐｈｙ ａｎｄ ＲＰＥ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｔｉｎａ ｏｆ ｔ｝ｌｅ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｇｎｎ ｍｕ— 寻找具有靶向性的细胞周期检验点抑制剂就显得颇为重要 。 ｔａｎｔ［３．Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓｃｉ，４４（３）：１２８７—１２９８． 斑马鱼及其胚胎在发育的早期过程中由于存在各种类型的细 ［１３］ＭｃＫｉｎｌｅｙ ＥＴ，Ｂａｒａｎｏｗｓｋｉ ＴＣ，Ｂｌａｖｏ ＤＯ，ｅｔ ａ１．Ｎｅｕｒｏｐｒｏ— 胞，因而，其在关于细胞周期的研究中具有明显的优势阎。抑癌 ｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ＭＰＴＰ—ｉｎｄｕｃｅｄ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｄｏｐａｍｉｎｅｒｇｉｃ ｎｅｕ— 基因ｐ５３对细胞的正常生长具有副调节作用，可以引起细胞 ｒｏｎｓ［３．Ｍｏｌ Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．２００５，１４１：１２８－３７． 凋亡和衰老，如果其结构和功能受到损伤就会导致细胞周期 ［１４］Ｅｌｗｏｒｔｈｙ Ｓ，Ｐｉｎｔｏ ＪＶ，Ｐｅｔｔｉｆｅｒ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｐｈｏｘ２ｂ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ 进程发生改变，易引发癌症的产生。有科学研究者利用斑马鱼 ｔｈｅ ｅｎｔｅｒｉｃ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ ｉｓ ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ａｎｄ ｉｓ ｐ５３突变体进行细胞周期相关药物的筛选，期望在肿瘤治疗领 ｓｏｘｌ０一ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ［３．Ｍｅｃｈ Ｄｅｖ，２００５，１２２（５）：６５９～６６９． 域起到较好的疗效田。 【１５］Ｃａｍｐｂｅｌｌ ＷＡ，Ｙａｎｇ ＨＷ，Ｚｅｔｔｅｒｂｅｒｇ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ３．７免疫、感染疾病模型 ｌａｃｋｉｎｇ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ ｅｎｈａｎｃｅｒ ２（Ｐｅｎ～２）ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅ ｅｘｃｅｓｓｉｖｅ 与＾类所相似的是，先天性免疫和适应性免疫系统也都存 Ｐ５３～ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ａｎｄ ｎｅｕｔｒｌａ ｌｏｓｓ ［Ｊ］．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ， 在于斑马鱼体内，且两系统的功能与人类极为相近，因而斑马 ２００６，９６：１４２３—１４４０． 鱼及其胚胎可以应用到人类免疫系统相关的疾病研究中嘞。据 ［１６】邹苏琪，殷梧，杨昱鹏，等．斑马鱼行为学实验在神经科学中 此，研究者分别建立了斑马鱼的细菌感染模型和肺结核模型。 的应用［Ｊ］．生物化学与生物物理学进展，２００９，３６（１）：５－１２． 综上所述，斑马鱼及其胚胎在人类相关的疾病研究中具 ｆ１７］Ｎｉｃｏｌｉ Ｓ，Ｒｉｂａｔｔｉ Ｄ，Ｃｏｔｅｌｌｉ Ｆ，ｅｔ ａ１．Ｍａｍｍａｌｉａｎ ｔｕｍｏｒ 有重要的应用价值。现有研究大多集中于利于相关疾病斑马 ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｅｍｂｒｙｏｓ【Ｊ］． 鱼模型对化合物进行高通量筛选，如果再对药物在斑马鱼体 Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，２００７，６７：２９２７－２９３ １． 内的吸收、分布及代谢等情况进行详细的跟踪研究，相信会为 ［１８］Ｈｅ ＺＨ，Ｈｅ ＭＦ，Ｍａ ＳＣ，ｅｔ ａ１．Ａｎｔｉ－ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ 人类疾病在实际的临床治疗中提供更为有实用价值的信息。 ｒｈｕｂａｒｂ ａｎｄ ｉｔｓ ａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ［Ｊ】．Ｊ Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ， 参考文献 ２００９，１２１（２）：３１３－３１７． 【１］Ｓｔｒｅｉｓｉｎｇｅｒ Ｇ，Ｗａｌｋｅｒ Ｃ，Ｄｏｗｅｒ Ｎ，ｅｔ ａ１．Ｐｍｄｕｃｆｉｏｎ ｏｆ 【１９］Ｓｐｉｔｓｂｅｒｇｅｎ ＪＭ，Ｔｓａｉ ＨＷ，Ｒｅｄｄｙ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｎｅｏｐ！ａｓｉａ ｉｎ ｚｅ— ｃｌｏｎｅｓ ｏｆ ｈｏｍａｚｙｇｏｏｓ ｄｉｐ１ｏｉｄ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ（Ｂｒａｃｈｙｄａｎｉｏ ｒｅｆｉｏ）［３３． ｂｒ ｓｈ（Ｄａｎｉｏ ｒｅｒｉｏ）ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ７，１２一ｄｉｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚ ｆａｌ ａｎ～ Ｎａｔｕｒｅ，１９８１，２９１（５８１３）：２９３—２９６． ｔｈｒａｃｅｎｅ ｂｙ ｔｗｏ ｅｘｐｏｓｕｒｅ ｒｏｕｔｅｓ ａｔ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ ｓｔａｇｅｓ ［２］Ｚｏｎ ＬＩ，Ｐｅｔｅｍｏｎ ＲＴ．Ｉｎ ｖｉｖｏ ｄｍｇ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｉｎ ｔｈｅ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ［Ｊ］．Ｔｏｘｉｃｏｌ Ｐａｔｈｏｌ，２０００，２８（５）：７０５—７１５． 【Ｊ］．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ，２００５，４（１）：３５—４４． ［２０］Ａｍａｔｒｕｄａ ＪＦ，Ｓｈｅｐａｒｄ ＪＬ，Ｓｔｒｅｍ ＨＭ，ｅｔ １ａ．Ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ａｓ ａ ［３］Ｈａｆｆｔｅｒ Ｐ，Ｇｒａｎａｔｏ Ｍ，Ｂｒａｎｄ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｍｏｄｅｌ ｓｙｓｔｅｍ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ，２００２，１（３）：２２９—２３ １． ｇｅｎｅｓ ｗｉｔｈ ｕｎｉｑｕｅ ａｎｄ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ［２１］Ｙｅｌｏｎ Ｄ．Ｃａｅｄｉａｃ ｐａｔｔｅｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉｎ ｚｅｂｒａｉｆｓｈ ｈｔｅ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ，Ｄａｎｉｏ ｒｅｒｉｏ［３．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１９９６，１２３：１－３６． ［３．Ｄｅｖ Ｄｙｎ，２００１，２２２（４）：５５２—５６３． ［４］Ｄｒｉｅｖｅｒ Ｗ，Ｓｏｌｎｉｃａ－Ｋｒｅｚｅｌ Ｌ，Ｓｃｈｉｅｒ ＡＦ，ｅｔ ａ１．Ａ ｇｅｎｅｔｉｃ ［２２］Ｍｕｒｐｈｅｙ ＲＤ，Ｓｔｅｍ ＨＭ，Ｓ￣ａｕｂ ＣＴ，ｅｔ ａ１．Ａ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｇｅ— ｓｃｒｅｅｎ ｆｏｒ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ａｆｆｅｃｔｉｎｇ ｅｍｂｒｙｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ［３．Ｄｅ－ ｎｅｆｉｃ ｓｃｒｅｅｎ ｆｏｒ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｒｓ ｉｎ ｚｅｂｒａ＿ｉｆｓｈ ｅｍｂｒｙｏｓ『Ｊ１． ｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１９９６，１２３：３７—４６． Ｃｈｅｍ ＢＭ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ，２００６，６８（４）：２１３－２１９． 【５］郑丽丽，吴端生．斑马鱼实验动物化研究及应用『Ｊ］．南华大学 『２３］Ｎｏｖｏａ Ｂ，Ｆｉｑｕｅｒａｓ Ａ．Ｚｅｂｒａｆｉｓｈ：ｍｏｄｅｌ ｏｆｒ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｉｎ－ 学报・医学版，２００８，３６（２）：２４９—２５１． ｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｎａｔｅ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｄｉｓ— 【６］霍中军，温宗华，刘靖，等．斑马鱼红系追血缺陷突变体的正 ｅａｓｅｓ『Ｊ１．２０１２，９４６：２５３－２７５． 向遗传筛选【Ｊ］．南方医科大学学报，２０１０，３０（５）：９３１—９３５． △基金项目：国家自然科学基金项目（１１１７５２２２；３０７６００５８）：教育 ［７】徐振华，赵慕钧，李栽平．斑马鱼与人类疾病模型的研究［Ｊ］ ．部新世纪优秀人才支持计划（ＮＣＥＴ一１０—０９６７）：石河子大学自然科学 生命的化学，２００２。２２（４）：３７６—３７８． 重点项目（ＺＲＫＸ２０ｏ９ｚＤ０１）。 ｆ８］Ｌａｎｇｅｎａｕ ＤＭ。Ｔｒａｖｅｒ Ｄ，Ｆｅ￣ａｎｄｏ ＡＡ，ｅｔ ａ１．Ｍｙｃ—ｉｎｄｕｃｅｄ 通讯作者 （上接９１页） 度大及侵人性操作多在带教老师指导下完成，而基础护理操 ［１１２；丽，主编．实用心胸血管外科护理及技术［Ｍ】．北京：科学出 作机会更多，与病人交流时间也相应较多。住监护室病人无家 版社，２００８：ｉｖ． 属陪伴，可能对护士的心理依赖较专业操作技术更为敏感。③ ［２］李继平，主编．护理管理学【Ｍ］．北京：人民卫生出版社，２００６： 我科主要收治心脏手术病人，病情稳定后即转回病房治疗，在 ４１，１８７． 监护室住院期间病情均较重。考虑到患者的病情及承受能力， 【３］郭家强，吴清玉．心脏外科护理学【Ｍ］．北京：人民卫生出版社， 我们设计的表格相对简单。可能对调查结果会有影响，还有待 ２Ｏ０２：７０．２１０． 进一步研究和改进。 ［４］张英梅，杨骏．ＰＤＣＡ循环在骨科新护士带教管理中的应用 参考文献 一 【Ｊ】．临床误诊误治，２０１０，２３（１１）：４７—４８．
