万能实验报告心得体会

　　一、实验目的

　　1.掌握配制马铃薯培养基（PDA）的一般方法。

　　2.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。

　　3.了解并掌握四类霉菌（根霉、毛霉、曲霉、青霉）的基本形态。

　　二、实验原理

　　1、霉菌

　　霉菌是可产生复杂分枝的菌丝体，其菌丝分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

　　霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约3～10μm），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。本实验采用毛霉、青霉，曲霉，根霉四种常见的霉菌作为菌种进行观察。

　　2、小室培养法

　　观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本次实验采用载玻片培养观察法（小室培养法）。

　　用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，沿琼脂边缘接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。

　　三.实验器材

　　1、菌种

　　曲霉（Aspergillus sp、），青霉（Penicillium sp、），毛霉（Mucor sp、）和根霉（Rhizopus sp、）培养48h的马铃薯琼脂（PDA）斜面培养物。

　　2、培养基及试剂

　　马铃薯琼脂（PDA），20%甘油（无菌），乙醇。

　　3、仪器及其它用品

　　无菌操作台，解剖刀，镊子，无菌吸管，U型玻璃棒，普通光学显微镜，擦镜纸，绸布，酒精灯，载玻片，接种针，培养皿等。

　　四.操作步骤

　　1、培养基的配制

　　按附录所示配方称取PDA各组分，先将马铃薯去皮，切成小块称取20g煮沸

　　姓名系年级学号组别科目题目霉菌的形态观察

　　同组者：

　　20min，然后先用1层纱布滤去未溶解的固体，再用6层纱布过滤，将滤液体积用无菌水调至100mL，然后再加入糖及琼脂，加塞后用牛皮纸包好，准备灭菌。

　　2、培养基及装置的灭菌

　　（1）灭菌准备

　　准备12个平皿，在其中10个平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一U形玻棒，其上放一洁净载玻片和三块盖玻片，盖上皿盖后再与另外2个空平皿一起用牛皮纸包好；在100mL锥形瓶中用甘油配制20%的甘油，加塞包好；最后取2mL移液管两支并用牛皮纸包好。

　　（2）灭菌

　　将上述用牛皮纸包好的仪器与试剂连同配好的PDA培养基一并放入灭菌锅中110℃灭菌20~30min（由于培养基中有葡萄糖，为防止由于高温而使糖发生糊化而变质，灭菌温度不宜过高）。

　　3、琼脂块制备

　　分别取已灭菌并溶化冷却至约50℃的马铃薯琼脂培养基6～7mL注入两个灭菌空平皿中，使之凝固成薄层。在两个凝固后的平板背部用记号笔画下约1×1cm的方格，通过无菌操作，用解剖刀沿画下的方格线将其切成方形的琼脂块。（注：解剖刀使用前应先在酒精中浸泡，然后在酒精灯上灼烧，冷却后再进行切割操作）

　　4、接种

　　在无菌操作台上，先用镊子将载玻片放于U型玻璃管上，然后用解剖刀取一小块儿琼脂块，置于载玻片上，用接种环分别从斜面培养物上挑取很少量的4种菌的孢子，分别接种于培养小室中琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。最后用移液管在培养小室中的圆滤纸上加2mL灭菌的20 %的甘油（用于保持平皿内的湿度），盖上皿盖并贴上标签，每一种菌接种两个小室（其中毛霉接种4个小室）。

　　5、恒温培养

　　将接种后的平皿正置于28℃培养箱中恒温培养7天。

　　6、镜检

　　在显微镜下直接观察小室培养后的载玻片，用低倍镜即可较为清晰的观察到霉菌的菌丝体及孢子，根据所学的四种菌的基本特征对四种菌进行观察比较与区分，必要时可以采用高倍镜对菌进行观察。

　　五.实验结果记录

　　1、四种霉菌的形态特征

　　姓名系年级学号组别科目题目霉菌的形态观察

　　同组者：

　　毛霉、根霉、青霉、曲霉的形态特征比较

　　2、四种霉菌的图示

　　图1根霉的形态（10×40）

　　姓名系年级学号组别科目题目霉菌的形态观察

　　同组者：

　　图2黑曲霉的形态（10×10）

　　图

　　3黑曲霉的形态（10×40）

　　图4黑曲霉足细胞（10×40）

　　姓名系年级学号组别科目题目霉菌的形态观察

　　同组者：

　　图5毛霉的形态（10×40）

　　分生小梗

　　隔

　　图6青霉的形态（10×40）

　　六、实验小结

　　通过本次实验，学会了小室培养培及马铃薯培养基的配制方法。另外，通过观察霉菌的形态并且有特别的关注不同霉菌的细节及不同之处，比如菌丝是否有隔，孢子囊形态等特征，细心比较各种霉菌细节状态的不同，掌握了霉菌的一些基本形态特征，扩展了视野。

　　七、思考题

　　1、黑曲霉和黑根霉在形态特征上有何区别？

　　①菌丝：根霉无隔有假根，曲霉无隔有足细胞。

　　②孢子梗：根霉位于假根上，曲霉由气生菌丝分化而来。

　　③孢子囊形态：根霉孢子囊表面平滑，曲霉表面不平滑，呈絮状。

　　2、如果要求对某放线菌或霉菌不同发育时期（基内菌丝→气生菌丝→孢子丝或

万能实验报告心得体会

　　一.实验目的

　　1、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法，初步了解霉菌的形态特征及鉴别依据。

　　2、学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。

　　3、了解血球计数板的构造和使用方法。学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。

　　4、总结并掌握细菌、放线菌和霉菌的鉴别方法。

　　二、实验原理

　　1、霉菌定义及用途

　　霉菌不是真菌分类中的名词，而是丝状真菌的统称。

　　霉菌在自然界中广泛分布，与食品的关系密切，是人类在实践活动中最早利用的一种微生物，如早期进行的酱和酱油的制作等。

　　霉菌也可以使食品发生变质或产生毒素，影响人体健康甚至危及生命。

　　2、霉菌特征

　　霉菌可产生分支的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

　　菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗的多（约3—10um），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍。因此，用低倍镜即可观察。

　　3、霉菌的菌落

　　松：由于霉菌的菌丝较粗较长，菌丝体疏松，因而形成的菌落也比较疏松，呈绒毛状、棉絮状或蜘蛛网状；

　　大：菌落形态较大，一般比细菌和放线菌的菌落大几倍到几十倍，有时会长满整个培养皿；

　　干：外观干燥，不透明；

　　挑：菌落与培养基间的连接紧密，不易挑取；

　　颜色：由于基内菌丝、气生菌丝、孢子颜色不同，不同的霉菌菌落表面呈现不同的颜色，菌落正反面、边缘与中心颜色常不一致。

　　同一种霉菌在不同的培养基上或不同的培养条件下所形成的菌落特征可能有所不同。但同一种霉菌在相同的培养条件下和培养基上所形成的菌落特征相对稳定。菌落特征是霉菌鉴定的重要依据之一。

　　4、霉菌的菌丝形态

　　构成霉菌营养体的基本单位是菌丝。菌丝的宽度一般为3—10μm，比放线菌菌丝宽很多倍，其菌可伸长并产生分枝。

　　许多分枝的菌丝相互交织在一起，称为菌丝体。

　　一部分菌丝存在于培养基质中吸收营养，称为基内菌线或营养菌丝。

　　另一部分菌丝向空中生长，称为气生菌丝。气生菌丝一部分形成生殖细胞，也有部分气生菌丝生成生殖细胞的保护组织或其它组织。

　　4、霉菌的菌丝

　　从结构来看，霉菌的菌丝有两种：

　　无隔菌丝：低等霉菌如根霉、毛霉等

　　有隔菌丝：高等霉菌如青霉、曲霉等

　　菌丝的孢子较大，在低倍镜下即可清晰观察到有隔或无隔菌丝和孢子及巨大的孢子囊。

　　5、霉菌的繁殖方式和繁殖结构

　　霉菌主要靠形成各种无性孢子和有性孢子进行繁殖。

　　霉菌的无性孢子：

　　厚垣孢子

　　节孢子

　　分生孢子

　　孢囊孢子

　　6、食品中常见的霉菌

　　霉菌的种类很多，下面仅介绍一些常见的、与食品有关的菌属。

　　（1）根霉菌属（Rhizopus）

　　现已发现根霉有20多种，根霉有假根和葡匐枝，假根主要起固定和吸收营养的作用。本属的黑根霉能产生果酸酶，引起果实的腐烂及甘薯的软腐，能产生反丁稀二酸，也是转化甾族化合物的重要霉菌。

　　（2）曲霉菌属（Aspergillus）

　　现已发现和应用的曲霉菌有100多种，在我国古代已利用曲霉菌制曲、酿酒、制酱等。曲霉菌还可用于制造蛋白酶、柠檬酸等一些有机酸。曲霉菌在自然界分布很广，空气中经常含有曲霉菌的孢子。常引起食品、衣服、皮革等物品的发霉和腐烂，有的菌株还可产生毒素，例如黄曲霉。曲霉菌具有发达的菌丝体，菌丝有隔膜，为多细胞菌丝。繁殖方式为无性和有性繁殖。其菌落呈现各种颜色。

　　（3）青霉菌属（Penicillium）

　　青霉菌在自然界的分布也非常广泛，土壤中常常有大量的青霉菌存在，在水果和粮食上经常发现青霉菌，已发现大约有几百种。青霉菌的菌丝体无色或浅色。菌落是深绿色。青霉菌可引起果蔬等的病害，如引起柑桔的病害而造成较大损失。但有些青霉菌能产生有经济价值的有机酸，如柠檬酸，葡萄糖酸等。在医药上常用的青霉素的产生菌是产黄青霉。

　　三、实验内容

　　（一）实验材料

　　1、菌种：培养法培养3~4天的根霉（Rhizopus sp、）、青霉（Penicillum sp、）和曲霉（Aspergillus sp、）平板。

　　2、其他物品：乳酸石炭酸溶液、载片、盖片等。

　　（二）记录三种霉菌的菌落特征

　　2、霉菌个体形态观察

　　直接制片观察：于洁净载玻片上，滴一滴乳酸石炭酸液于载片；用解剖针从霉菌菌落的边缘处取小量带有孢子的菌丝置于液滴中，再细心地将菌丝挑散开；然后小心地盖上盖玻片，注意不要产生气泡。置显微镜下先用低倍镜观察，必要时再换高倍镜。挑菌和制片时要细心，尽可能保持霉菌自然生长状态。加盖玻片时切勿压入气泡，以免影响观察。

　　（1）水浸片法观察（根霉与曲霉）

　　根霉：加热至沸腾后观察

　　曲霉：直接观察

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　　实验题目：供应链啤酒游戏——物流与信息系统

　　组号（代号）

　　一、实验目的

　　1、通过啤酒实验中，根据市场需求（老师每次提出的需求量），来模拟供应链上各生产商、批发商、零售商的订货需求变化，从而增加同学对供应链管理、牛鞭效应、库存持有成本、缺货成本及在时间滞延、资讯不足的环境下，信息沟通、人际沟通的必要性的认识。

　　2、分析造成零售商订货量波动的原因及解决方法。

　　3、分析造成零售商库存量波动的原因及解决方法。

　　4、探索供应链中的物流、信息流、资金流和商流系统是如何运作？

　　5、认识供应链中需求变异放大原理，即“牛鞭效应”的形成过程。

　　6、探索“牛鞭效应”的产生原因、危害及解决办法。

　　二、实验基本步骤

　　每班各为一条的供应链，每条供应链中有一家生产商为，其为两家批发商生产啤酒，每家批发商为各自下属的四家零售商供应货物，彼此间不能越界，每家零售商每周尽可能为顾客出售所需的啤酒，并且每周都需向上一级订货，订货量根据市场需求预测而定。参加游戏的学员各自扮演不同的角色，他们只需每周做两个决定，那便是订购多少啤酒，出售啤酒，唯一的目标是使利润最大化。

　　由于本组零售商只有两名学员，所以设销售人员一名和库存人员兼经理一名。情人啤酒是我们的经营产品。

　　1、第一周由销售人员接受顾客需求订单。

　　2、销售库存中的啤酒（第一周期初库存为12箱），销售数量不得大于本期需求量加累计欠货量（欠货可以在以后各期归还）。

　　3、销售人员填写零售商情况表中的啤酒需求量A、销量B、本期欠货量c、累计欠货量D、期初库存量E。

　　4、接收批发商送货（零售商向批发商订货时，订货提前周期为两周，批发商欠零售商的货同样可以在以后各期归还。因此接货在第三周开始）。

　　5、库存人员填写零售商情况表中的本期批发商应送货量F、批发商实际送货量G、本期欠货量H、累计欠货量I、期末库存量J。

　　6、库存人员向批发商订货，填写零售商订货单。

　　7、经理填写零售商情况表中的本期订货量K、本期利润L。审核零售商情况表，结转库存。

　　三、实验数据分析

　　从图中可以看出，啤酒市场需求量逐步上升，我们的订货量也逐步增加，我们每期的期末库存量也基本稳定。我们的订货量基本是高于市场需求量的，这是我们能够持续每期保持住利润的主要原因。在第10期我们对顾客的缺货量达到4件，为所有周期缺货量最高的一期。而这次我们主要的缺货原因是我们的上一级批发商在第9期没有能送达我们实际的订购量。

　　以上数据，特别是最后几期数据说明了，顾客和批发商之间信息的不对称而引起了牛鞭效应，这种现象对批发商带来了经济损失，由于我们的订的货不能送达，更使我们零售商库存不能满足实际市场需求儿损失了订单，造成了不小的损失。在如今激烈的市场竞争中，由于我们的缺货，造成的损失，影响我们今后的发展。

　　四、实验体会

　　为适应顾客需求量变换，考虑到未来顾客需求量会增大，所以我们会根据历史需求，预测需求量，而适当加大订购量，满足今后的市场需求量。批发商也同样会有像我们这样的想法，进行加量批发。这样，当顾客的需求量变化不大的情况下，零售和批发等环节的实际订购量会逐步放大。这样一层层的增加，就造成了所谓的“牛鞭效应”。

　　为了应付市场需求量变大，作为零售商尽可能增加库存量，这就有可能造成库存积压，如果库存量大了，就不需要再增大订货量。我们不能掌握顾客的需求也不能掌握批发商的供货能力，所以只能多备货。我们需要对市场需求准确的预测，才能稳定住库存，减少牛鞭效应。

　　生产商离顾客比较远，需要经过批发商和零售商的传递，导致市场需求信息的扭曲程度很大，各层对市场需求的预测偏差越来越大。各层都害怕缺货，所以都采用大库存，牛鞭效应就会明显。

　　我们这次游戏涉及的方面比较少，造成牛鞭效应的原因也比较少。特别价格变动，如果价格降低，增大库存，然后市场需求小于订货量，就会造成库存成本的增加，大大影响了利润。如果想解决牛鞭效应，需要各层信息共享，实施供应商管理库存策略，零售商与供应商通过协商确定了订单处理的业务流程以及库存控制的相关参数，比如最低库存水平、订货点等等。实施VIM工策略，大大缩短了产品的订货期以及产品的流通环节，让我们这些流通环节能够对市场的变化做出及时的响应，从而降低供应链的库存，减少供应链的成本，提高了供应链的绩效，有效避免了需求信息的波动，最终弱化了本次供应链中的牛鞭效应。